皮肤屏障完整性测试：电阻/电导值法

皮肤屏障完整性测试：电阻/电导值法

在皮肤屏障完整性测定中，常用TEWL、氚化水渗透和电阻/电导值法，如下图所示：

本文对 电阻/电导值法 的测定过程及相关注意事项进行详细阐述，具体如下：

电阻/电导法测定皮肤完整性有几种变量，以电阻、电导或相关的电概念报告测试结果，用于表征流过皮肤的电流量。与皮肤相关的跨膜电阻测试通常指跨膜电阻（TEER）皮肤屏障完整性测试。测试结果可以用电阻的倒数“电导”为单位进行描述。电阻/电导值法测试皮肤屏障完整性通常采用“旨在测量电子电路或电子元件的电感（L）、电容（C）和电阻（R）”的仪器；这些仪器通常被称为LCR仪表，具有可调节的不同设置（测试参数）。 

皮肤电阻率仪

TEER皮肤屏障完整性测试的一个推荐方法是：将皮肤安装到扩散池中（如，夹在供给室和接收室之间），使皮肤的角质层暴露在空气中（即，朝向供给室），皮肤下侧与接收液（如PBS，pH7.4）接触，然后将皮肤表面温度平衡至32°C±1°C。     

将少量的离子溶液（足以覆盖皮肤切片的整个表面）短暂的施加到皮肤角质层上；然后，将LCR仪表的一端电极与接收室中溶液接触，而另一端电极与供给室中溶液接触。在测定通过皮肤的电阻后（如，以kΩ 为单位，按面积归一化法，注意电阻与面积成反比），将供给室中的溶液移出，用吸收性低脂棉将皮肤表面轻轻吸干。然后，在自研外用制剂或 RS 上样前，先将皮肤与上面的干燥空气接触，并平衡足够长的时间，使角质层恢复到正常的水合状态。

TEER皮肤屏障完整性测试的结果，可能因 LCR 仪表设置（如，频率）和所用的测试技术方法不同，产生很大变化。电阻/电导值法测试皮肤屏障完整性接受标准的合理性，可通过试验数据证明，即：所选的接受标准应当可以适当地区分屏障完整性受损的皮肤切片与屏障完整性合格的皮肤切片。

注意事项：

1）测定方法不应不可逆的改变皮肤完整性。可以接受将水溶液上样到皮肤表面后，短暂的改变角质层水合状态的情况，但在外用制剂上样前，经过足够长的时间后，角质层应可以恢复到正常的水合状态。    

对于电阻/电导值测试法，将皮肤暴露于水溶液中30分钟后移除，而后，在5分钟后上样是不合适的，因为没有进一步评估皮肤角质层水合状态对不同外用制剂生物利用度区分灵敏度的影响。

2）接受标准应是皮肤未通过屏障完整性测试的截止值。未通过皮肤完整性测试的皮肤切片不应进行上样操作，但可作为无剂量空白对照皮肤切片。通过皮肤完整性测试的皮肤切片，可被视为具有合格的屏障完整性，可以进行上样试验。

3）皮肤屏障完整性测试的目的是识别（和排除）屏障完整性（完整无缺）受损的皮肤切片。其目的并不是减少人体皮肤屏障功能（渗透性）的内在变异性，人体皮肤的内在变异性是其固有的特性。此外，皮肤对外用制剂中药物的相对渗透性，可能与皮肤对水分的渗透性无关；因此，限制皮肤对水分渗透的可变性（使用更严格的接受标准，排除更多的皮肤切片）可能不一定会减少IVPT研究结果的可变性。

4）接受标准应能够区分屏障完整性受损的皮肤切片。对于接受标准的论证，可通过“在特意破坏皮肤屏障的前后（如，通过反复使用胶布剥离越来越多的角质层、用30号针多次刺穿皮肤，或使用其他物理或化学手段破坏皮肤屏障）”，将其分别安装到扩散池并平衡后，根据屏障完整性的测定结果来评估。根据选择的接受标准，在破坏前通过测试的皮肤切片，对其破坏后应不能通过测试。