双氯芬酸钠凝胶 IVRT 试验：两种取样模式（全取/部分取）一致性探究

凝胶剂（Gel）是指原料药与能形成凝胶的辅料制成的具凝胶特性的稠厚液体或半固体制剂。凝胶剂可分为全身用凝胶剂（Transdermal gel）和局部用凝胶剂（Topical gel）两类。按给药途径不同，可以进一步将局部用凝胶剂分为皮肤用凝胶剂、眼用凝胶剂、阴道用凝胶剂、直肠用凝胶剂等。

从2000年至2024年，FDA共批准上市了26款局部皮肤用凝胶剂NDA上市申请，平均每年批准1款。

表1.2000年至2024年FDA批准的局部皮肤用凝胶剂产品（NDA）

双氯芬酸钠是FDA在2007年批准的局部皮肤用凝胶剂产品，它可用于缓解肌肉、软组织和关节的轻至中度疼痛，如缓解肌肉、软组织的扭伤、拉伤、挫伤、劳损、腰背部损伤引起的疼痛以及关节疼痛等，也可用于骨关节炎的对症治疗。

在药物的体外释放（IVRT）研究过程中，通常会采用全部取样与部分取样两种取样方式来进行。这两种取样方式各有优缺点，全部取样更接近体内情况，取样量大，过滤前处理方便；而部分取样，扩散池内API浓度逐步升高，有利于检测分析，并可以保持稳定的溶液状态。市售的透皮扩散仪通常会提供全部取样与部分取样两种取样模式，理论上这两种取样模式所得到的结果应保持一致。

为了验证透皮扩散仪在两种不同取样模式下结果的一致性，我们挑选了某一品牌的双氯芬酸钠凝胶作为研究对象，进行了体外释放试验（IVRT）研究，实验设置了全取样和部分取样两种取样模式，并将得到的结果进行一致性对比。实验详情如下：

实验目的

在同一台透皮扩散仪上同时对同一批次样品进行全部取样以及部分取样的体外释放（IVRT）实验，验证实验结果是否一致。

材料与设备

聚醚砜滤膜0.45μm Φ25mm

双氯芬酸钠凝胶

接收介质（pH6.8 PBS）

VDC12 Plus透皮扩散仪（合邦科仪）

高效液相色谱仪（合邦科仪）

双氯芬酸钠标准品溶液

实验方法

1、配置接收介质：称量磷酸二氢钾6.8g，氢氧化钠0.8g，加水1000ml，搅拌均匀后备用。

2、上样：分别在仪器L侧的L1、L2、L3、L4、L5、L6以及R侧R1、R2、R3、R4、R5、R6位置进行上样。上样量300mg±5%。

3、实验方法：L侧采用1ml部分取样补液3ml的取样方式，R侧采用全部取样的方式进行实验。实验时长4h，分别于0.5h，1h，2h，3h，4h进行样品采集。

4、样品检测：对采集样品进行HPLC检测。（液相方法：流动相，甲醇：0.12%冰醋酸=75:25，色谱柱ZORBAX SB-C18 4.6×250mm，波长276nm，柱温35℃，流速1ml/min，进样量5μL）

5、实验结果处理：计算每个扩散池在每个采样时间点的药物释放量，并将药物累积释放量与时间的平方根作图，所得曲线的斜率即药物的释放速率，并将L侧以及R侧结果进行比较。

实验结果

部分取样模式的药物累积释放量与时间平方根的关系图如图1所示，在各个时间点对6个样品进行平行实验，部分取样所有取样点RSD均小于7.21%，R²均大于0.99，部分取样的6个样本，其累积释放量与时间平方根呈线性相关，且释放速率相近。

图1 部分取样模式的累积释放量-时间平方根关系图

全部取样模式的药物累积释放量与时间平方根的关系图如图2所示，在各个时间点对6个样品进行平行实验，全部取样所有取样点RSD均小于5.67%，R²均大于0.99，全部取样的6个样本，其累积释放量与时间平方根呈线性相关，且释放速率相近。

图2 全部取样模式的累积释放量-时间平方根关系图

分别将部分取样与全部取样各个时间点的药物累积释放量取平均值，然后与时间的平方根作图，将得到的两条曲线进行对比，如图3所示，部分取样与全部取样的药物累积释放量均值-时间平方根关系曲线几乎完全重合。将部分取样和全部取样得到的释放速率进行U检验计算，比较两种取样方式释放行为一致性，U检验置信范围为97.6-106.5%。