RSD太大，体外透皮试验又失败了？NO NO NO！
在体外透皮吸收试验（IVPT）研究过程中，不少研究者在获取通量曲线后，发现 Jmax（最大通量）和 AMT（累计渗透量）的批内相对标准偏差（RSD%）数值偏高，便认定实验失败，随即开展全方位排查。然而，需明确的是，Jmax 和 AMT 的批内 RSD与IVPT研究最终的生物等效性（BE）判定并无直接关联。
FDA在《体外透皮试验（IVPT）工业指南》的“IVPT方法验证”部分明确提出：开展 IVPT 研究时，需以表格形式系统汇总重复测定所得的批内均值、标准偏差（SD）及变异系数（%CV）。该指南虽为数据整理提供了规范，但并未对 %CV（即 RSD%）的允许范围作出明确界定。此外，关于 RSD% 对实验结果的影响，指南既未提供系统性分析，也缺乏相关论证，这一空白可能导致研究者对数据变异的过度解读。
FDA《体外透皮试验（IVPT）工业指南》截图
为了深入剖析这一问题，我们从《体外透皮试验（IVPT）工业指南》附录Ⅱ中选取了极具代表性的示例数据。这批数据涉及 6 个供体，针对每个供体，均采集了6个自制+6个参比切片的数据。原始数据如下：
平衡数据集表格
非平衡数据集表格
分别计算平衡数据集和非平衡数据集自制（T）、参比（R）的AMT 和Jmax的均值、标准偏差和RSD%，结果如下：
在进行等效性判定时，有客户会产生一些困扰，究竟需要多少个供体数据，才能借助 SAS 软件开展可靠的分析？为了说明这一问题，我们分别选取一个、两个、三个、四个、五个、六个供体，每个供体6个自制+6个参比数据，运用SAS软件进行了等效性评估（每个供体单独的等效性评估使用EXCEL表格进行，文中不再详细描述）。结果如下：
（1）平衡数据集
六个供体，SWR=0.50242＞0.294，使用SABE方法，95%上置信区间上限UB=-0.022242＜0，点估计值1.10125在BE极限[0.8000，1.2500]内，结果：等效。
将每个供体的RSD%数据、等效性评估结果与多个供体的等效性评估结果汇总如下：
（注：每个供体单独的等效性评估使用EXCEL表格进行，文中不再详细描述）
通过表格可以看出，每个供体的RSD%大小高低不一，但是最终的等效性结果均为不等效，表明RSD%与最终结果的是否等效没有必然关系。一个供体、两个供体、三个供体、四个供体、五个供体数据结果均是不等效，但是六个供体数据结果却是等效的，可见整体数据的等效性跟部分数据的不等效性也没有必然关系。
（2）非平衡数据集
六个供体，SWR=0.50651＞0.294，使用SABE方法，95%上置信区间上限UB=-0.10907＜0，点估计值1.06982在BE极限[0.8000，1.2500]内，结果：等效。
将每个供体的RSD%数据、等效性评估结果与多个供体的等效性评估结果汇总如下：
（注：每个供体单独的等效性评估使用EXCEL表格进行，文中不再详细描述）
通过表格可以看出，每个供体的RSD%大小高低不一，但是1,2,6号供体结果为不等效，3,4,5号供体结果为等效，表明RSD%与最终结果是否等效没有必然关系。而且，虽然一个供体、两个供体结果均是不等效，三个供体、四个供体、五个供体、六个供体结果是等效的，可见部分数据的不等效性与整体数据的等效性也没有必然关系。
在初步的IVPT研究中，FDA法规建议：采用多个皮肤供体（如，4-6个皮肤供体），且每个试验组的每个供体至少4个重复皮肤切片。在实际的数据处理过程中，我们一般建议至少2个供体数据导入SAS软件进行分析。
FDA《体外透皮试验（IVPT）工业指南》截图
1、FDA 发布的《IVPT工业指南》并未对批内或批间相对标准偏差（RSD%）提出明确要求。在体外透皮试验（IVPT）研究中，自制产品与参比产品在最大累积渗透量（AMT）、最大渗透通量（Jmax ）指标上，RSD% 数值的高低与 IVPT结果生物等效的判定，并不存在必然联系。
2、《IVPT工业指南》建议采用多个皮肤供体开展实验，推荐使用4 - 6个皮肤供体，同时要求每个试验组针对每个供体，至少制备4个重复皮肤切片。但在实际研究过程中，部分用户受成本因素制约，或出于开展预实验的考量，仅采用少量（1 - 2个）皮肤供体进行实验。这种做法致使实验样本量不足，实验结果往往难以满足统计学要求，无法有效支撑研究结论。
